畜禽用藥物靶動(dòng)物安全性試驗(yàn)指導(dǎo)原則

一、概述

（一）目的

靶動(dòng)物安全性試驗(yàn)的目的是了解畜禽對受試藥物推薦劑量、多倍劑量和延長用藥時(shí)間使用時(shí)的臨床反應(yīng)、組織病理學(xué)和生理生化指標(biāo)變化的特征；從而為明確受試藥物的不良反應(yīng)和臨床應(yīng)用時(shí)的注意事項(xiàng)提供依據(jù)。

（二）適用范圍

本指導(dǎo)原則適用于申報(bào)用國內(nèi)外已上市的原料藥研發(fā)的畜禽用藥物新制劑或增加靶動(dòng)物的已上市制劑等。對局部應(yīng)用的藥物通常不要求進(jìn)行靶動(dòng)物安全性試驗(yàn)，但供全身皮膚用藥、可能引起全身吸收作用的藥物以及通過局部用藥發(fā)揮全身作用的藥物則應(yīng)進(jìn)行靶動(dòng)物安全性試驗(yàn)。對于含全新創(chuàng)制的原料藥制成的制劑進(jìn)行的靶動(dòng)物安全性試驗(yàn)應(yīng)參照VICH的《獸藥靶動(dòng)物安全性指導(dǎo)原則》（VICH GL43 Guideline on target animal safety for veterinary pharmaceutical products）進(jìn)行。

該指導(dǎo)原則旨在為獲得與靶動(dòng)物安全性評價(jià)有關(guān)的必要信息而提供一般性指導(dǎo)（說明）。特提出進(jìn)行合理解釋。

二、基本原則

1．靶動(dòng)物安全性試驗(yàn)應(yīng)根據(jù)養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)實(shí)際開展，以保證評價(jià)結(jié)果的科學(xué)性、客觀性。

2．靶動(dòng)物安全性試驗(yàn)原則上應(yīng)對受試藥物所適用的每種靶動(dòng)物分別進(jìn)行。

3．靶動(dòng)物安全性試驗(yàn)應(yīng)在符合獸藥GCP條件下進(jìn)行。

4．靶動(dòng)物安全性試驗(yàn)的設(shè)計(jì)應(yīng)充分考慮實(shí)驗(yàn)動(dòng)物毒理學(xué)研究的結(jié)果。

三、試驗(yàn)設(shè)計(jì)

（一）試驗(yàn)動(dòng)物

1．品種

靶動(dòng)物安全性試驗(yàn)一般選擇受試藥物擬用的健康且具有代表性的動(dòng)物種屬和類別。

2．試驗(yàn)階段

應(yīng)根據(jù)藥物的推薦使用階段慎重選擇動(dòng)物的年齡。如果該制劑預(yù)期用于幼齡未成熟動(dòng)物，則靶動(dòng)物安全性試驗(yàn)中的動(dòng)物通常選用擬申請產(chǎn)品適用的最低年齡；否則，應(yīng)使用成熟健康動(dòng)物。畜禽靶動(dòng)物安全性試驗(yàn)階段可參考下表。

畜禽靶動(dòng)物安全性試驗(yàn)階段選擇參考表

3．來源

應(yīng)從有試驗(yàn)動(dòng)物資質(zhì)證明的飼養(yǎng)單位購買，如果沒有資質(zhì)證明的動(dòng)物，應(yīng)來源清楚，并經(jīng)檢疫合格后才能用于試驗(yàn)。

4．飼養(yǎng)環(huán)境

動(dòng)物應(yīng)在試驗(yàn)環(huán)境下進(jìn)行適應(yīng)性飼養(yǎng)后再開展試驗(yàn)。飼養(yǎng)環(huán)境不應(yīng)對試驗(yàn)結(jié)果造成影響。處理組和對照組的動(dòng)物應(yīng)進(jìn)行相同飼養(yǎng)管理，試驗(yàn)動(dòng)物在試驗(yàn)前通常應(yīng)有1周或更長的時(shí)間適應(yīng)新環(huán)境。并且在試驗(yàn)基線期之前完成預(yù)防性治療（如免疫和驅(qū)蟲等）。試驗(yàn)期間不能同時(shí)使用其他獸藥。

（二）受試藥物

受試藥物應(yīng)與擬上市的制劑完全一致，有完整的產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，有符合乎規(guī)定格式的說明書。受試藥物應(yīng)來源于同一批號，由申報(bào)單位自行研制并在符合GMP條件下的車間生產(chǎn)，并提供中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所或其他獸藥檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)出具的產(chǎn)品檢驗(yàn)合格報(bào)告。

（三）動(dòng)物分組與劑量設(shè)計(jì)

1．劑量與分組

一般設(shè)置4個(gè)試驗(yàn)組：空白對照組、推薦劑量組、中間劑量組（高于推薦劑量）和估計(jì)的藥物中毒劑量組。一般選擇最大推薦劑量的倍數(shù)，分別為1、3、5倍劑量組，另設(shè)空白對照組。毒性強(qiáng)的藥物可以根據(jù)具體情況設(shè)計(jì)1、2、3倍最大推薦劑量試驗(yàn)組。對安全范圍較窄的藥物，還可按1、1.5和2倍的最大推薦劑量進(jìn)行試驗(yàn)。

2．動(dòng)物數(shù)

靶動(dòng)物安全性試驗(yàn)通常包括相對少量的試驗(yàn)單元，每個(gè)試驗(yàn)組大動(dòng)物（如牛）、繁殖母豬等不少于4頭，中動(dòng)物（育肥豬、羊等）不少于6頭，小動(dòng)物（雞、鴨、鵝、家兔等）不少于8只。除非產(chǎn)品預(yù)期僅用于一種性別，原則上每個(gè)劑量組應(yīng)包含雄性和雌性動(dòng)物各半。

（四）給藥方案

1．給藥途徑與方法

按標(biāo)簽說明書中推薦的給藥途徑和方法給藥。

2．給藥周期

按照受試藥物擬在臨床推薦的給藥周期制訂給藥方案，對于只給藥一天的制劑，應(yīng)至少連續(xù)給藥3天；對短期用藥（2天及以上）的制劑，試驗(yàn)持續(xù)用藥至推薦用藥時(shí)間的2倍，但一般不超過15天；對于推薦長期應(yīng)用（15天或更長）的藥物，必須持續(xù)至推薦的最長時(shí)間。

（五）試驗(yàn)周期

每個(gè)靶動(dòng)物安全性試驗(yàn)都要進(jìn)行一個(gè)完整的試驗(yàn)周期，試驗(yàn)周期包括實(shí)驗(yàn)環(huán)境適應(yīng)期、給藥周期和停藥后觀察期。一般情況下環(huán)境適應(yīng)期為一周，給藥周期按給藥方案進(jìn)行，停藥后觀察期一般不能少于7天；用于繁殖動(dòng)物藥物的靶動(dòng)物安全性試驗(yàn)周期應(yīng)為一個(gè)繁殖周期。

（六）觀察指標(biāo)

1．臨床觀察

試驗(yàn)周期內(nèi)應(yīng)每天觀察試驗(yàn)動(dòng)物采食和飲水情況、臨床表現(xiàn)（如體溫、呼吸、行為、精神狀況等）、生長性能以及相關(guān)動(dòng)物產(chǎn)品的產(chǎn)量等；應(yīng)詳細(xì)觀察和記錄不良反應(yīng)；擬長期使用的藥物還應(yīng)記錄給藥前和給藥結(jié)束時(shí)動(dòng)物體重和飼料消耗量。

對試驗(yàn)中出現(xiàn)死亡的動(dòng)物應(yīng)進(jìn)行尸檢，如果可能，最好進(jìn)行組織學(xué)分析，并盡可能明確病因。

2．血液學(xué)檢查

給藥前和給藥結(jié)束時(shí)，每個(gè)動(dòng)物分別采集血樣進(jìn)行血液常規(guī)、血液生理生化指標(biāo)及其他與受試物相關(guān)的生理參數(shù)的檢測。必要時(shí)在用藥中期增加血液學(xué)檢查。

3．病理學(xué)檢查

（1）尸體解剖學(xué)檢查

在試驗(yàn)期間出現(xiàn)與藥物有關(guān)的臨床癥狀或生理生化指標(biāo)明顯異常的動(dòng)物均應(yīng)屠宰并進(jìn)行尸體解剖學(xué)檢查；如果未見異常的試驗(yàn)，只對最高劑量組和空白對照組全部動(dòng)物進(jìn)行剖檢（用于繁殖母畜的藥物除外），分別在給藥結(jié)束時(shí)和試驗(yàn)結(jié)束時(shí)各屠宰50%的動(dòng)物，詳細(xì)檢查心、肝、脾、肺、腎、胸腺、胰腺、胃、十二指腸、回腸、直腸、淋巴結(jié)、腦、骨髓等器官有無異常。

（2）組織病理學(xué)檢查

尸體解剖學(xué)檢查時(shí)出現(xiàn)異常的器官均應(yīng)進(jìn)行系統(tǒng)的組織病理學(xué)檢查；如果各器官未見異常時(shí)，取高劑量組和空白對照組的心、肝、脾、肺、腎等器官進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。

4．其他特異性觀測指標(biāo)

根據(jù)受試藥物的作用特點(diǎn)和用途，增加相應(yīng)的特異性觀測指標(biāo)和敏感性功能指標(biāo)（如：對在繁殖母畜上使用的藥物，應(yīng)考察受孕情況、產(chǎn)活仔數(shù)和哺乳成活數(shù)等；對在泌乳母畜上使用的藥物，則應(yīng)考察斷奶仔畜的體重和斷奶成活率等；對具有免疫調(diào)節(jié)作用的藥物，則應(yīng)增加免疫學(xué)觀察指標(biāo)等）。

（七）數(shù)據(jù)記錄與結(jié)果分析

1．在試驗(yàn)實(shí)施過程中，試驗(yàn)方案所涉及的內(nèi)容均應(yīng)逐一記錄。數(shù)據(jù)記錄應(yīng)真實(shí)、準(zhǔn)確、完整、規(guī)范、清晰，并妥善保管。數(shù)據(jù)的有效位數(shù)以所用儀器的精度為準(zhǔn)，采用國家法定計(jì)量單位和國家推薦使用的單位。

2．統(tǒng)計(jì)分析

選擇合適的統(tǒng)計(jì)分析程序，對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。比較試驗(yàn)組與對照組間各項(xiàng)指標(biāo)（如血液學(xué)和血液生理生化等）的顯著性差異，分析藥物不良反應(yīng)產(chǎn)生的原因，并提出注意事項(xiàng)。

四、試驗(yàn)報(bào)告

為公正、科學(xué)地評價(jià)藥物對靶動(dòng)物的安全性，對試驗(yàn)報(bào)告做如下要求：

（一）試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)提供試驗(yàn)獲取的所有數(shù)據(jù)，包括所有試驗(yàn)動(dòng)物。未納入統(tǒng)計(jì)分析的數(shù)據(jù)或由于數(shù)據(jù)缺乏、數(shù)據(jù)丟失而無法評價(jià)的情況也應(yīng)報(bào)告，并說明在各組別中的分布情況。

（二）每個(gè)靶動(dòng)物安全性試驗(yàn)必須單獨(dú)形成最終報(bào)告，報(bào)告應(yīng)符合GLP和GCP的質(zhì)量管理要求。